“โปรแกรมการวินิจฉัยและรักษาโรคปอดบวมจากไวรัสโคโรนารีใหม่ (รุ่นทดลองที่เก้า)” ใช้ค่า Ct ในการตรวจหากรดนิวคลีอิก ≥35 เป็นหนึ่งในพื้นฐานที่สำคัญสำหรับการปล่อยการจัดการการแยกหรือการปลดปล่อยดังนั้น ค่า Ct ของชุดตรวจหากรดนิวคลีอิกแสดงถึงอะไร?ค่า Ct ของชุดอุปกรณ์ต่างๆ เปรียบเทียบกันได้หรือไม่?ยิ่งค่า Ct ต่ำเท่าไร ประสิทธิภาพของชุดก็ยิ่งดีขึ้นเท่านั้นหรือไม่
ค่า Ct (วัฏจักรเกณฑ์, Ct) คือจำนวนรอบ PCR เมื่อความเข้มของสัญญาณเรืองแสงเชิงปริมาณการเรืองแสงแบบเรียลไทม์เกินขีดจำกัดที่ตั้งไว้ชุดตรวจหากรดนิวคลีอิกใช้มงกุฎใหม่เป็นตัวอย่างสำหรับปฏิกิริยาเดียวกันของชุดทดสอบเดียวกันในการตรวจจับตัวอย่างที่มีไวรัสสองตัวคือ A และ B ขนาดของค่า Ct แสดงถึงจำนวนสำเนาของยีนไวรัสซึ่งก็คือปริมาณไวรัสในระดับหนึ่งยิ่ง Ct ของตัวอย่าง B ต่ำเท่าใด ปริมาณไวรัสก็จะยิ่งสูงขึ้นค่า Ct เป็นสัดส่วนผกผันกับปริมาณไวรัสและการติดเชื้อข้อดีและข้อเสียของชุดคิทเชิงปริมาณการเรืองแสงแบบเรียลไทม์ที่แตกต่างกันไม่สามารถตัดสินด้วยขนาดของค่า Ct เพียงอย่างเดียว เนื่องจากค่า Ct ของชุดอุปกรณ์ต่างๆ นั้นเทียบกันไม่ได้การประเมินประสิทธิภาพของชุดอุปกรณ์จำเป็นต้องวัดจากแง่มุมของความไว (ขีดจำกัดการตรวจจับขั้นต่ำ) ความจำเพาะ ความแม่นยำ ความเสถียร และการใช้งานในการวินิจฉัยผู้ผลิตรีเอเจนต์แต่ละรายมีศิลปะการต่อสู้สิบแปดประเภท และพวกเขามีพลังเวทย์มนตร์ในการใช้งาน ดังนั้นฉันจะไม่ลงรายละเอียดที่นี่
สำหรับเครื่องมือ/ระบบการวิเคราะห์ PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ทั่วไป การได้มาซึ่งค่า Ct และการใช้อย่างแพร่หลายในแอปพลิเคชันการตรวจจับเชื้อโรคนั้นเป็นสิ่งที่คุ้นเคยสำหรับทุกคนด้วยการพัฒนาของอุตสาหกรรมและความก้าวหน้าของเทคโนโลยี อุปกรณ์และรีเอเจนต์ของ QPCR ได้พบกับโอกาสและความท้าทายYiou Think Tank (2021 Research Report on China's Genetic Testing Industry: Technology) วิเคราะห์ว่าบริษัทส่วนใหญ่ในอุตสาหกรรม QPCR ในประเทศของฉันกำลังประสบปัญหาทั่วไปจากเทคโนโลยีเพื่อตอบสนองต่อปัญหาเหล่านี้ แนวทางแก้ไขส่วนใหญ่แบ่งออกเป็นสองประเภท: การเร่งการปรับปรุงเทคโนโลยีและการปรับใช้เทคโนโลยีใหม่
POCT สำหรับการวินิจฉัยระดับโมเลกุล QPCR เป็นหนึ่งในทิศทางการพัฒนาของอุตสาหกรรม และการปรับปรุงประสิทธิภาพเป็นปัจจัยสำคัญในการเร่งการประยุกต์ใช้เทคโนโลยีสำหรับอุปกรณ์ POCT ที่มีปริมาณงานตัวอย่างเดียวของ QPCR จะปรับค่า Ct ให้เหมาะสมของพารามิเตอร์หลักของปฏิกิริยาเดี่ยวใน R&D ได้อย่างไรอุปกรณ์เดียวกัน ระบบปฏิกิริยาเดียวกัน และความเข้มข้นของแม่แบบเดียวกัน ตามหลักวิชา ยิ่งค่า Ct ของปฏิกิริยาเดี่ยวมากเท่าใด ประสิทธิภาพของเอนไซม์ในปฏิกิริยาก็จะยิ่งต่ำลง
ในกระบวนการปรับปรุงประสิทธิภาพของปฏิกิริยาของเอนไซม์และการปรับค่า Ct ให้เหมาะสมนั้น สามารถวิเคราะห์กราฟการขยายสัญญาณเชิงปริมาณของวงจร PCR แบบทั่วไป 40 รอบก่อนเส้นโค้งการขยายเสียงในรูปด้านล่างแบ่งออกเป็นเฟสพื้นหลังเรืองแสง เฟสการขยายแบบเอ็กซ์โพเนนเชียล เฟสเชิงเส้น และเฟสที่ราบสูงเพื่อให้บรรลุพื้นหลังการเรืองแสงที่ต่ำกว่า เท่าที่สามารถแยกแยะได้จากค่าการเรืองแสงของการขยายแบบเอ็กซ์โพเนนเชียลในช่วงต้น จำเป็นต้องทดสอบจากตัวพาวัสดุสิ้นเปลืองปฏิกิริยา การคัดกรองการออกแบบหัววัดไพรเมอร์ และระบบบัฟเฟอร์ปฏิกิริยาช่วงเวลาการขยายแบบเอ็กซ์โพเนนเชียลเป็นปฏิกิริยาที่ตรงที่สุดของกิจกรรมของเอนไซม์ และยังเป็นข้อพิสูจน์ของการประสานงานที่สมบูรณ์แบบของอุปกรณ์ POCT ตัวพาปฏิกิริยา และรีเอเจนต์ในขณะนี้ จำเป็นต้องปรับและทดสอบการควบคุมอุณหภูมิของอุปกรณ์ การรับและวิเคราะห์สัญญาณออปติคัล ความเข้ากันได้ทางชีวภาพของตัวพา และประสิทธิภาพของระบบของรีเอเจนต์ในทุกด้านในที่สุด การขยายทั้งหมดเสร็จสิ้น และผลลัพธ์จะต้องนำเสนอโดยอัลกอริธึมข้อมูลที่เข้มงวดเพื่อให้ได้ค่า Ct ที่เหมาะสม
ขั้นตอนเล็ก ๆ ในการเพิ่มประสิทธิภาพของค่า Ct คือขั้นตอนที่นับไม่ถ้วนของบุคลากรด้านการวิจัยและพัฒนาในความวิตกกังวลทั้งกลางวันและกลางคืน ทุกครั้งที่ “ภูเขาและแม่น้ำมองไม่เห็น ต้นหลิวมืดมิด ดอกไม้ก็สดใส ยังมีอีกหมู่บ้านหนึ่ง” ซึ่งทำให้เรามีความกล้าหาญและกระตือรือร้นที่จะก้าวไปข้างหน้า อีกครั้ง.
โพสต์เวลา: Sep-29-2022